精宏鼓風(fēng)干燥箱對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎家兔關(guān)節(jié)滑膜組

來(lái)源：未知發(fā)布日期：2019-09-09 09:39【大中小】

骨性關(guān)節(jié)炎( OA) 是骨傷科最常見(jiàn)的疾病，隨著我國(guó)人口老齡化趨勢(shì)加速，骨性關(guān)節(jié)炎的患者也逐年增加，其中膝關(guān)節(jié)是骨性關(guān)節(jié)炎最常見(jiàn)最多發(fā) 病的部位。隨著病情發(fā)展，引起的直接后果就是活動(dòng)受限，喪失勞動(dòng)力，嚴(yán)重者可導(dǎo)致殘廢。蒙藥森登－ 4 味湯由文冠木、訶子、梔子、川楝子等藥味組成，有著清熱燥黃水的功能，主治痛風(fēng)、痹病、關(guān) 節(jié)黃水病、關(guān)節(jié)水腫等，在臨床上廣泛用于治療關(guān) 節(jié)炎及水腫等病癥。

1 材料

1. 1 動(dòng)物

健康成年家兔 70 只，清潔級(jí)，雌雄不限，體質(zhì)量( 2. 5 ± 0. 2) kg，由長(zhǎng)春億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào): SCXK( 吉) 2016 － 001。適應(yīng)性喂養(yǎng) 1 周。

1. 2 藥品與試劑

森登－ 4 味湯: 由文冠木、訶子、梔子、川楝子等藥味組成，內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī) 院制劑室制備成散劑，加 50 mL 蒸餾水制成混懸液備用。白介素－ 1β、腫瘤壞死因子－ α、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子－ βELISA 檢測(cè)試劑盒: 上海源葉生物技術(shù)有限公司; 戊巴比妥鈉: 上海化學(xué)試劑有限公司。

1. 3 主要儀器

AUY － 120 電子天平( max 201g d = 0. 01mg) : 日本島津公司; TG16 － WS 臺(tái)式離心機(jī): 長(zhǎng)沙湘瑞離心機(jī)有限公司; DY89 － 1 電動(dòng)勻漿機(jī): 寧波電子科技有限公司; Sunrise M7. 2 型多功能酶標(biāo)儀: 美國(guó) Molecular Devices; 上海精宏DHG-9140A恒溫干燥箱: 上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司; 冰箱: 青島海爾公司。

2 方法

80 只成年家兔恒溫恒濕條件下適應(yīng)性喂養(yǎng) 7 d 后，隨機(jī)選取 64 只家兔采用改良 Hulth 法進(jìn)行動(dòng)物模型制造，其余 16 只做正常對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)家兔稱重，編號(hào)，用 30 g /L 戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉( 30 mg / kg) 后，將兔固定于手術(shù)臺(tái)上，雙膝伸直位。常規(guī)剃毛、消毒、鋪巾。于兔右側(cè)膝關(guān)節(jié)髕內(nèi)側(cè)作長(zhǎng)約 2. 5 cm 的縱行皮膚切口，切斷內(nèi)側(cè)副韌帶，完整摘除內(nèi)側(cè)半月板，切斷前交叉韌帶。建模時(shí)注意保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨面不受損傷; 徹底止血，逐層縫合，常規(guī)消毒包扎。術(shù)后 1 周肌注青霉素 40 萬(wàn) U / d，以防感染。之后進(jìn)行每天 3 次驅(qū) 趕，每次驅(qū)趕時(shí)間至少 30 min，4 周后經(jīng)檢查關(guān)節(jié)軟骨面粗糙、軟骨外觀呈灰黃色、無(wú)正常透明度及光澤可見(jiàn)明顯缺損及骨贅形成，顯示動(dòng)物模型制造成功。將成模大鼠隨機(jī)分為 4 組，模型組和森登－ 4 味湯高( 45 mg / kg) 、中( 30 mg / kg) 、低劑量( 15 mg / kg) 組，每組 16 只，各組給予相應(yīng)計(jì)量灌胃給藥，模型組、正常組蒸餾水灌胃，每天 1 次，連續(xù)給藥 28 d。末次給藥后 24 h，處死( 空氣栓塞法) 家兔，在無(wú)菌條件下，用剪刀自股骨下段及脛骨上段分別剪取完整膝關(guān)節(jié)，切開(kāi)關(guān)節(jié)，顯露膝關(guān)節(jié)腔，肉眼觀察關(guān)節(jié)軟骨的顏色、光澤、光滑度、滑膜充血腫脹等情況，然后取關(guān)節(jié)滑膜組織，進(jìn)行組織勻漿，用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)白細(xì)胞介素( IL － 1β) 、腫瘤壞死因子( TNF － α) 、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子( TGF － β) 含量，操作嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。

3 結(jié)果

正常對(duì)照組家兔隨飼養(yǎng)時(shí)間的增長(zhǎng)，精神狀態(tài)良好，被毛光澤，行動(dòng)自如，無(wú)異常狀態(tài)。造模成功家兔精神萎靡，不喜活動(dòng)，進(jìn)食及飲水量均減少，被毛干枯且無(wú)光澤，活動(dòng) 量明顯減少; 膝關(guān)節(jié)出現(xiàn)輕微的炎癥反應(yīng)及關(guān)節(jié)部位出現(xiàn)腫脹，陸續(xù)出現(xiàn)出現(xiàn)關(guān)節(jié)全部水腫且伴有關(guān) 節(jié)活動(dòng)功能障礙情況，出現(xiàn)關(guān)節(jié)紅腫和軟組織腫脹，隨之逐漸消退，關(guān)節(jié)部位僵硬，活動(dòng)明顯受限，不愛(ài)活動(dòng)。森登－ 4 味湯給藥組較模型組病情有所好轉(zhuǎn)，進(jìn)食及飲水均增加，體質(zhì)量有所增加，精神狀態(tài)良好，被毛變光澤，行動(dòng)轉(zhuǎn)好。

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